Odstavec předpisu 211/2004 Sb.
Vyhláška Ministerstva zemědělství č. 211/2004 Sb., o metodách zkoušení a způsobu odběru a přípravy kontrolních vzorků
Příl.47
Příl.47
Příprava vzorků a požadavky na metody zkoušení používané pro úřední kontrolu
dodržování maximálních limitů fusariových toxinů v potravinách
1. Předběžná opatření
Vzhledem k tomu, že rozložení fusariových toxinů je velmi
nestejnoměrné, musí být přípravě laboratorních vzorků a
zejména homogenizaci vzorků věnována zvýšená pozornost.
Veškeré odebrané množství potraviny se použije k přípravě
zkušebního vzorku.
2. Zpracování vzorku obdrženého laboratoří
Každý laboratorní vzorek se jemně rozemele a důkladně
promísí postupem, kterým se dosáhne úplné homogenizace.
Pokud se maximální limit vztahuje na sušinu, stanoví se
obsah sušiny výrobku v části homogenizovaného vzorku
metodou, která prokazatelně umožňuje přesné stanovení
sušiny.
3. Rozdělení vzorků pro zkoušení za účelem potvrzení výsledku
a obhajoby
Duplikátní vzorky pro zkoušení za účelem potvrzení
výsledku, obhajoby v obchodním sporu a pro rozhodčí
zkoušení se odeberou ze zhomogenizovaného vzorku.
4. Metody zkoušení a požadavky na řízení laboratoře
4.1 Definice
Nejběžnější definice, které musí laboratoř použít:
r = opakovatelnost: hodnota, pod níž bude podle
očekávání s danou pravděpodobností (obvykle 95
%) ležet absolutní hodnota rozdílu výsledků 2
samostatných stanovení za podmínek
opakovatelnosti (tj. stejný vzorek, tentýž
pracovník, tatáž aparatura, tatáž laboratoř,
stanoveno krátce po sobě); r = 2,8 x sr,
sr = směrodatná odchylka vypočtená z výsledků
získaných za podmínek opakovatelnosti.
RSDr = relativní směrodatná odchylka vypočtená z
výsledků získaných za daných podmínek
-
opakovatelnosti [(s/rx) x 100],
R = reprodukovatelnost: hodnota, pod níž bude podle
očekávání s danou pravděpodobností (obvykle 95
%) ležet absolutní hodnota rozdílu výsledků
dvou samostatných stanovení za podmínek
reprodukovatelnosti (tj. u stejného materiálu
získaného pracovníky různých laboratoří, za
použití standardizované zkušební metody); R =
2,8 x sR,
sR = směrodatná odchylka vypočtená z výsledků
získaných za podmínek reprodukovatelnosti,
RSDR = relativní směrodatná odchylka vypočtená z
výsledků získaných za podmínek
-
reprodukovatelnosti [(sR/x) x 100].
4.2 Obecné požadavky
Metody zkoušení použité pro účely kontroly potravin musí
být v souladu s § 9.
4.3 Zvláštní požadavky
4.3.1 Pracovní charakteristiky
Nejsou-li přímo použitelným předpisem Evropských
společenství stanoveny zvláštní metody, laboratoře zvolí
validovanou metodu za předpokladu, že zvolená metoda
splňuje pracovní charakteristiky uvedené v tabulkách 1, 2,
3 a 4.
Tabulka 1: Pracovní charakteristika pro deoxynivalenol
------------------------------------------------------------------
Množství mikrog/kg deoxynivalenol
-------------------------------------------
RSDr % RSDR % Výtěžnost %
------------------------------------------------------------------
> 100,00 - =< 500,00 =< 20,00 =< 40,00 60,00 - 110,00
------------------------------------------------------------------
> 500,00 =< 20,00 =< 40,00 70,00 - 120,00
------------------------------------------------------------------
Tabulka 2: Pracovní charakteristika pro zearalenon
------------------------------------------------------------------
Množství mikrog/kg zearalenon
-------------------------------------------
RSDr % RSDR % Výtěžnost %
------------------------------------------------------------------
=< 50,00 =< 40,00 =< 50,00 60,00 - 120,00
------------------------------------------------------------------
> 50,00 =< 25,00 =< 40,00 70,00 - 120,00
------------------------------------------------------------------
Tabulka 3: Pracovní charakteristika pro fumonisin B1 a B2
------------------------------------------------------------------
Množství mikro/kg Fumosin B1 nebo B2
-------------------------------------------
RSDr % RSDR % Výtěžnost %
------------------------------------------------------------------
=< 500,00 =< 30,00 =< 60,00 60,00 - 120,00
------------------------------------------------------------------
> 500,00 =< 20,00 =< 30,00 70,00 - 110,00
------------------------------------------------------------------
Tabulka 4: Pracovní charakteristiky pro T-2 a HT-2 toxin
------------------------------------------------------------------
Množství mikro/kg T-2 toxin
-------------------------------------------
RSDr % RSDR % Výtěžnost %
------------------------------------------------------------------
50,00 - 250,00 =< 40,00 =< 60,00 60,00 - 130,00
------------------------------------------------------------------
> 250,00 =< 30,00 =< 50,00 70,00 - 130,00
------------------------------------------------------------------
------------------------------------------------------------------
Množství mikrog/kg HT-2 toxin
-------------------------------------------
RSDr % RSDR % Výtěžnost %
------------------------------------------------------------------
100,00 - 200,00 =< 40,00 =< 60,00 60,00 - 130,00
------------------------------------------------------------------
> 200,00 =< 30,00 =< 50,00 70,00 - 130,00
------------------------------------------------------------------
Detekční limity použitých metod se neuvádí, protože
přesnost je uvedena pro uvažované koncentrace.
Přesnost metody odpovídá hodnotě vypočtené z Horwitzovy
rovnice:
RSDR = 2(1 - 0,5 log C)
kde:
- RSDR je relativní směrodatná odchylka vypočtená z
výsledků získaných za podmínek reprodukovatelnosti
-
[sR/x) x 100],
- C je poměr koncentrací (tj. 1 = 100 g/100 g, 0,001 %
1,000 mg/kg).
Toto je zobecněná rovnice pro přesnost, u níž se ukázalo,
že u většiny rutinních metod analýzy nezáleží na analytu a
matrici, nýbrž pouze na koncentraci.
4.3.2 Přístup založený na vhodnosti pro daný účel
K hodnocení přijatelnosti metod zkoušení lze použít
alternativní přístup založený na vhodnosti pro daný účel,
v jehož rámci se vymezí pouze funkce vhodnosti jako
jediný parametr, pokud existuje omezený počet plně
validovaných metod zkoušení. Funkce vhodnosti je funkce
nejistoty, která stanoví nejvyšší hodnotu nejistoty, jež
je považována za vhodnou pro daný účel.
Vzhledem k omezenému počtu metod zkoušení, které jsou plně
validovány mezilaboratorní zkouškou, zejména pro stanovení
T-2 a HT-2 toxinu, se použije přístup založený na funkci
nejistoty, kterým se stanoví nejvyšší přijatelná
nejistota, také k posouzení vhodnosti pro daný účel metody
zkoušení, kterou laboratoř použije. Laboratoř může použít
metodu, která poskytuje výsledky s maximální standardní
nejistotou. Maximální standardní nejistota se vypočítá
pomocí následující rovnice:
Uf = odmocnina (LOD/2)2 + (alfa x C)2
kde:
Uf je maximální standardní nejistota,
LOD je mez detekce metody,
C je příslušná koncentrace (mikrog/kg),
alfa je konstantní číselný faktor používaný v
závislosti na hodnotě C. Hodnoty, které mají být
použity, jsou uvedeny v tabulce 5.
Jestliže metoda zkoušení poskytuje výsledky s nejistotou
měření menší než maximální standardní nejistota, bude
metoda vhodná do stejné míry jako metoda, která splňuje
pracovní charakteristiky uvedené v tabulkách.
Tabulka 5: Číselné hodnoty, které mají být v závislosti na
příslušné koncentraci použity pro alfa jako konstantu v
rovnici uvedené v tomto bodě
--------------------------------------------------
C (mikrog/kg) alfa
--------------------------------------------------
= < 50,00 0,20
--------------------------------------------------
51,00 - 500,00 0,18
--------------------------------------------------
501,00 - 1000,00 0,15
--------------------------------------------------
1001,00 - 10000,00 0,12
--------------------------------------------------
> 10000,00 0,10
--------------------------------------------------
4.4 Výpočet výtěžnosti a uvádění výsledků
Výsledky zkoušky se uvedou s korekcí nebo bez korekce na
výtěžnost. Musí být uveden způsob uvedení výtěžnosti a
její hodnota. Výsledek zkoušky s korekcí na výtěžnost se
použije pro kontrolu dodržení limitu.
Výsledek zkoušky musí být uveden ve tvaru (x +/- U), kde x
je výsledek zkoušky a U je rozšířená nejistota měření.
4.5 Požadavky na laboratoře
Laboratoře musí splňovat požadavky zvláštního právního
předpisu.*)
*) Například § 3 odst. 3 zákona č. 146/2002 Sb., o Státní
zemědělské a potravinářské inspekci a o změně některých
souvisejících zákonů, ve znění pozdějších předpisů.